紫外分光光度计标准操作及维修保养规程

依据：《GMP》与药品生产质量检验的要求

目的：建立紫外分光光度计标准操作及维修保养规程，用以保证实验仪器操作的一致性。

范围：紫外分光光度计

1、技术参数

1.1工作波段：200—800nm

1.2波长精度：±0.5nm

1.3杂散光：在于220nm处低于1%

1.4分辨率：仪器能分开贡365.02，365.48，366.29 nm三条谱线。

1.5偷光率测量范围：0—200%T（数显100.0相当即于100%T）

1.6吸光度测量范围：—0.301—3A（数显1.000相当于1A）

1.7透光率精度：±0.5%

1.8透光率重现性：0.5%

1.9T—A转换精度：±0.001A

1.10比色皿误差自动校正精度：±0.1%T

1.11环境条件：温度5—35℃湿度≤85%

1.12电压：220V

2、操作前准备

2.1插上电源插头，闭合光源电器箱开关，“电源”指示灯亮。

2.2选择灯源：

a.闭合“钨灯”开关，“钨灯”指示灯亮，钨灯被点燃。

b.闭合“氘灯”开关，扳钮向吓—3秒，灯丝被加热后，立即将开关向上打，“氘灯”指示灯亮，氘灯被引燃后，扳钮自动恢复到中间位置。

2.3光源选择，根据测量的波段范围选择好光源，利用拨杆进行。

2.4将波长指示器置于所需要测的波长。

2.5根据波长选择比色皿，对于350 nm以上的波长，可以用玻璃比色皿；对于350 nm溶液以下的波长一定要用石英，将比色皿放入托架内（其中一个比色皿放标准溶液，其他比色皿放被测溶液），然后盖好。

2.6打开“电源”开关，仪器预热20分钟。

2.7操作过程中出现199.9数字闪烁，表示光能量大强，应首先打开试样室盖（隔断光路），然后减小狭缝或调整光楔（100%T旋钮）。

2.8如果波长读数“零位”走失时，所需波长与计数器显示值位置不对，可用数量零级光谱来校正，方法如下：松开#15（2只）锁紧螺钉，转动#拨杆，使计数

器读数为000，再转动#1波长手轮，使输出光强数码显示T值为最大。反复几次使零级光谱与计数器“零位”相一致后，重新锁紧#（2只）螺钉。

3、操作过程

3.1透过率、吸收度测量

a.暗电流调零：开启电源后，若试样室盖未打开，将显示提示符P.1（请做第一步骤操作），打开试样室盖直到接触检测开关，提示符P.1消失，显示暗电流值。如果它的绝对值小于5.0，则两秒内自动归零，否则可调节面板上之0%T旋钮。

b.调整参比讯号（100T/OA）：微机所显示的提示符为P.2（请做第二步操作）。将T—A—C旋钮开关置T/A，参比溶液放进1号试样槽并移入光路，关闭试样室盖，显示参比讯号强度，调整狭缝和光楔（试样槽拉手左面之100%T旋钮），使显示数在90.0—119.9%T或相应A值范围以内，2秒以内将自动调整为100%T/OA。

c.比色皿误差校正：为校正比色皿的系统误差，要求在同一次测量过程中，比色皿与槽位编号一一照应。将使用的比色皿盛参比溶液放进试样槽，移入光路，所显示的T（或A值）就反映了该与1号槽中比色皿之间的配对误差。按一下ADJ（Adjust）校正键，则误差数据存入微机并自动校正为100%T/OA。这项操作在每次开机后只需作一次，若所用的比色皿配对性很好，可免去这一步骤。开机时，校正系数初始值为1，即相当于不校正。

d.用同比色皿盛被测溶液放进同一试样槽，则显示校正后的透过率或吸光率。

3.2浓度测量

a.标准对照法

b.按3.1节（1）—（3）操作。

c.将标准浓度的样品放如光路。

d.旋钮开关至C，分别按三个浓度置数键，使显示数与已知浓度值一致，浓度值仅取其三为有效数字，小数点位置自定义。

e.将被测式样移入光路，则显示样品的浓度（比色皿误差已校正）。

3.3标准曲线法（标准曲线为直线）

a.按3.1节（1）—（3）操作。

b.旋钮至A， 调整光楔使A值变化至标准曲线高端某一点的坐标A0。

c.旋钮至C，按浓度置数键显示数与对应于A0的浓度值C0一致。

d.重新调整对比讯号后按（1）之（4）操作。

3.4测试完毕，依次关闭主机电源开关，电气箱开关，拔下电源插头，盖上护罩。

3.5认真填写使用操作记录。

4、保养及注意事项

4.1为了确保仪器能够稳定工作，电压变动较大的地方，自备220V稳压器一只。

4.2当仪器工作时如无输出、光源不亮，应首先检查保险丝是否有损坏，然后检查电路。

4.3仪器外壳要良好接地，其余裸露零件其对地电压不得超过24V

4.4式样室应加干燥剂变色硅胶，并经常检查与更换，保证干燥。

4.5当仪器停止工作时应切断电源。

4.6比色皿用毕，应立即用蒸馏水冲洗清洁，并用干净柔软的纱布将水迹擦干，

以防止表面光洁度变坏而影响透过率。

4.7为了避免仪器积尘和沾污，在停止工作时间内用塑料套子罩住整个仪器，在套子内放数袋硅胶。

4.8仪器使用半年左右或搬动要检查波长精度等，以确保仪器使用。易耗元件、光电管和光源，通常使用一定时间后要衰老和损坏，必须调换新的。

4.9灯电亮一段时间后不能用手碰灯，不能留有指纹。

4.10长时间的紫外线照射对眼睛有害，戴上太阳镜可以保护眼睛。

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