如何选择并正确使用缓冲液
点击: 次 时间:2017-08-24 11:23
选择缓冲液的步骤:
1、确定最佳分离状态时的流动相pH2、选择具有与流动相pH相近的pKa的缓冲液(即使浓度稀也具有较强能力的缓冲液)
3、确认检测波长下缓冲液是否有大的吸收(在波长210nm附近进行检测时,不能用醋酸和柠檬酸的缓冲液)
缓冲液的使用:
(1)使用前必须过滤。(2)使用后一定要进行清洗,以免造成腐蚀、磨损、阻塞:用含5%甲醇 的水溶液冲洗30min(1ml/min),再用甲醇冲洗30min。
(3)用纯水冲洗泵头清洗管路。
(4)易受到细菌和霉菌的影响。
附:常用代表性的弱酸的pKa值
pK1 | pK2 | pK3 | |
醋酸 | 4.87 | ||
柠檬酸 | 3.13 | 4.76 | 6.40 |
磷酸 | 2.16 | 7.21 | 12.32 |
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