液相色谱仪正相和反相的详细介绍

液相色谱仪使用说明中经常会提到正相色谱和反相色谱，那么什么是正相色谱，什么是反相色谱，它们有什么区别呢？

其实正相色谱和反相色谱是由流动相和固定相极性大小来分类的，通常正相色谱固定相极性比流动相极性大，常用的流动相有正己烷、二氯甲烷、乙酸乙酯等。而反相色谱刚好相反，是流动相极性比固定相极性极性大，常用的流动相有甲醇、乙腈、四氢呋喃、水等。反相色谱是目前最通用的HPLC方法，大约95%的色谱工作者都在使用。

正相色谱体系中常用的是哪种色谱柱？正相体系常见的柱子有硅胶柱、氨基柱、CN基柱和Diol二醇基柱，最普通的是硅胶柱，正相硅胶柱一般保存在什么溶剂里面比较合适？短期和长期都建议保存在正相测定所用的流动相中，一般是正己烷和极少量的异丙醇 (95/5, 99/1, 99.5/0.5均可)。

正相柱在使用过程中与反相柱相比有什么需要注意的地方？正相柱和反相柱比，最需要注意的是水分，正相柱对水分非常敏感，流动相中水分含量的些微变化对保留时间影响很大，因此正相柱测定前平衡时间需要几个小时甚至更长。

一根色谱柱怎么知道是使用于反相色谱还是正相色谱呢？可以根据填料来判断，目前来说常用的反相填料有：C18、C8、C4 和苯基等，正相填料有：硅胶、氨基、氰基、二醇基等。

普通的C18柱能作为正相色谱柱使用吗？一般不能，因为C18固定相属于疏水性相对比较强的，疏水性强就是极性很弱，应该找不出极性比它更弱的流动相了。况且色谱柱在使用时，要注意极性固定相尽量避免极性溶剂，非极性固定相尽量避免非极性溶剂，否则可能发生类似相似相溶的作用。对一般的反相柱，也就是洗干净后置于纯甲醇（乙腈）或者是80%左右的甲醇（乙腈）水中，然后用堵头塞紧柱两头，以免保存溶剂挥发，下次使用前拿出来重新活化一下。

（内容参考仪器信息网）