液相色谱仪为什么会出现峰分叉？

液相色谱仪出现峰分叉可能有以下几方面原因：

1、色谱柱污染

在开始时没问题，在使用一段时间后出现这个问题，可能是由于污染引起的。这时需要对色谱柱加强冲洗，即使用比方法流动相更强的溶剂冲洗色谱柱。

2、保护柱失效

如果样品基质比较脏，使用一段时间之后，发现的峰分叉或拖尾等问题，很有可能是保护柱失效造成的。一般粗略判断标准，塔板数、压力或分离度的改变超过10%，就需要更换保护柱了。保护柱是消耗品，建议直接更换，不需要再生。

3、接头连接不正确

如果色谱柱在使用过程中发现每个峰的峰形都出现问题，先考察是否有连接问题。管线可能太长或太短，这种情况可能导致渗漏或峰分叉/拖尾。如果管线太长，密封圈位置不当，将发生渗漏。如果管线推出的距离不够，将会产生一段死空间，形成混合腔，导致柱外体积，使峰形变坏。

4、溶剂效应

在反相LC中、如使用10O%有机溶剂或10O%强溶剂，大体积进样时，将使色谱峰过早洗脱出色谱柱，导致峰变形。进样溶剂改为用水稀释，与流动相更为兼容，即使进样体积较大也不会出现峰变形。较早流出的峰或靠近溶剂前沿的峰更容易出现拖尾。在液相色谱中用溶于流动相的小体积进样最为理想。

5、样品过载

当进样量超过柱子的容量，样品峰会呈现分叉或拖尾，解决方案就是减少进样量。

6、色谱柱塌陷

由于柱塌陷引起的峰分叉，很难修复。如果流动相pH>7或在色谱柱pH耐受围临界点附近长时间使用，是比较容易造成硅胶填料溶解塌陷。如果出现色谱柱塌陷，您会看到色谱图中的每个峰峰形都会发生变化（峰拖尾、加宽或分叉），短时间内可以反方向运行，建议直接更换色谱柱。日常使用的过程中注意将温度降低到40℃以下，特别是使用高pH流动相时。

7、柱前筛板部分堵塞长期分析脏样品

如果没有保护柱或在线柱前过滤器，颗粒物和强吸附物很可能在柱入口筛板发生堵塞，同时伴随着压力升高，解决办法一般是色谱柱反冲。

8、色谱柱性能下降

使用色谱柱时，会用其分析各种目标物、使用各种流动相并分离不同的样品基质，经过长时间的使用，色谱柱会受到这些物质的影响发生一些微妙的变化，从而引起峰分叉、拖尾或保留时间的改变。

（内容来源仪器信息网）