分光光度计注意事项和影响显色反应的因素

分光光度计是各种实验室检测核酸或者蛋白等样品浓度常用的仪器之一。选择可见和紫外可见分光光度计时关键的指标有三点：一是波长范围，二是波长准确度，三是杂散光参数。波长范围的选择是由用户实验需要所定，波长范围越宽的价格越贵。波长准确度及杂散光参数的数值越低，表示性能越好。

723N可见分光光度计

754N 紫外可见分光光度计

一、分光光度计仪器注意事项

1、分光光度计应该放到较干燥的房间内，使用时放置在坚固平稳的工作台上，室内照明不宜太强。热天时不能用电扇直接向仪器吹风，防止灯泡灯丝发亮不稳定。

2、使用仪器前，使用者应该首先了解仪器的结构和工作原理，以及各个操纵旋钮之功能。

3、在未按通电源之前，应该对仪器的安全性能进行检查，电源接线应牢固，通电也要良好，各个调节旋钮的起始位置应该正确，然后再按通电源开关。

4、在仪器尚未接通电源时，电表指针必须于“0”刻线上，若不是这种情况，则可以用电表上的校正螺丝进行调节。

5、保持分光光度计清洁、无污染，是成功操作的关键。

二、影响显色反应的主要因素

将试样中被测组分转变成有色化合物的化学反应叫显色反应。分光光度法一般用于微量组分的测定，故一般选择生成有色化合物的、吸光度高的显色反应。但灵敏度高后，反应不一定选择性好，故应全面加以考虑。对于高含量组分的测定，不一定选用最灵敏的显色反应。

影响显色反应的主要因素有以下几点：

1、显色剂用量：通过实验来确定适用量；

2、反应液的酸碱度（pH）。溶液酸碱度直接影响金属离子与显色剂存在形式以及有色化合物组成的稳定性；

3、反应温度：不同的显色反应需要不同的反应温度，一般显色反应可在室温下完成；

4、显色反应时间：显色反应的速度有快有慢；

5、干扰离子的影响：应采用适当方法消除其影响。