决定色谱仪保留时间的因素介绍

所谓保留时间锁定，就是使特定化合物的保留时间在不同仪器、不同色谱柱（但标称固定相和相比相同）之间保持不变。

一、概述

决定保留时间的因素如下：

1、化合物的性质、固定液的性质。

2、操作条件。即载气流速、柱温、毛细管柱规格和检测器类型等。

二、详细说明

1、载气控制

对于同种载气来说，压力和流速是影响保留时间的参数；

不同厂家的压力表和流量计的制造精度有所不同，故当不同仪器的压力和流量显示完全一致时，柱内流量也不尽相同；

现在有了EPC，这一问题基本得到了解决；虽然同一厂家制造的EPC不可能每项都严格一致，但差异微小，通过压力的自动调节完全可以补偿这一差异。

2、温度控制

保留时间对温度极为敏感，过去采用水银温度计测量柱温时，重现性显然有问题。现在都用热敏元件与电子线路来控制温度，精度大为提高。不同仪器间温度重现性令人满意。即使有0.5℃的温度差异，我们仍能通过调节柱前压的办法来使保留时间达到重现。

3、色谱柱规格

不同厂商的色谱柱，尽管标称规格一致，但难免有内径的不均匀、固定液膜厚的变化、以及柱长的不精确，这些都会造成保留时间的波动。

同一根色谱柱在使用过程中会发生变化，比如重新安装或因柱污染而截去1～2cm后，若其他操作条件不变，保留时间就不能重现了。

目前，同一厂商的色谱柱制造重现性已相当高，而不同厂家的色谱柱尚不能完全重现，尤其是极性柱。但我们如果采用同一厂家的色谱柱，就可基本解决这一问题。至于色谱柱长度的变化，可以通过调节柱前压来补偿。

4、检测器类型

常规检测器：常压下工作；

MS：高真空下工作；

AED：高于大气压（如，10kPa）下工作。

这样，当比较常规检测器和MS或AED所得结果时，即使柱前压严格一致，柱压降也不同，保留时间就不能重现。采用EPC时，就很容易通过调节压力使柱压降保持相同。

三、小结

通过上述分析我们可以得出结论，只要仪器的载气和温度控制精度足够高，只要色谱柱标称规格一致，就可以通过调节柱前压的方法来补偿操作参数的微小变化，从而实现保留时间的重现，这就是RTL的基础。