怎样改善液相色谱仪的分离度？

液相色谱仪的分离原理是利用待分离的各种物质在固定相和流动相两相中的分配系数、吸附能力、亲和能力等的不同来进行分离的。改善液相色谱的分离度主要有以下三个方面：

一、流动相

1、流动相中有机溶剂的类型和比例会影响色谱分离的选择性

对于反相色谱模式，常用的有机溶剂有甲醇、乙腈和四氢呋喃，可以通过改变流动相中的有机相种类或调整其比例，来改变选择性和分离度。

2、流动相的pH值影响分离度

对于中性的化合物，流动相pH值的改变不会对其选择性有太大的影响，对于酸性化合物和碱性化合物(可解离的化合物)，影响较大。

3、可以通过添加缓冲盐来调整流动相的离子强度，来改善目标化合物与固定相之间的保留。

二、固定相

固定相中键合相的类型、填料的孔径、封端类型以及色谱柱的粒径和尺寸都会影响色谱分离的结果。

其中最主要的因素是键合相的选择，当你采用C18固定相无法得到好的分离结果，可以考虑极性较强的C8固定相，或者选择性与其有较大差异的苯基己基柱进行尝试，或者采用封端的色谱柱代替未封端的色谱柱。

三、硬件系统

对硬件系统的一些参数进行调整，也可以在一定程度上改善色谱分离的结果。

比如较高的采样速率；采用较小内径的管线和较小的流通池来减小扩散体积和延迟体积减小色谱峰的展宽；或者通过提高色谱柱的柱温来改善分离度。

（内容参考仪器信息网）