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你知道使用液相色谱仪的四个关键点么

点击: 次 时间:2022-04-18 16:51

液相色谱仪是指利用混合物在液固或不互溶的两种液体之间分配比的差异,对混合物进行先分离,而后分析鉴定的仪器。液相色谱仪在使用过程中有哪四大关键因素要注意?

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上海仪电分析LC210液相色谱仪

一、液相色谱仪本身

对于仪器本身一般不会有问题,特别是刚买回来的新仪器。对于仪器本身来说最重要的就是仪器的校验,刚买回来的仪器一般都是由生产厂家先对仪器做系统的确认工作,包括IQPQOQ,确认顺利通过后,再请国家或省级仪器检定局的来校验,检定合格后就可以放心使用了。

除此之外,一些做得好的公司每半年会对仪器进行一次内部校验,目的就是为了保证仪器的正常可运行状态。

二、色谱条件

色谱条件一般包括流动相、色谱柱、检测波长、流速及进样量。

流动相就涉及到配制流动相所用到的水和试剂试液,水一般要求用超纯水或其他水的电阻率不大于18.2兆欧级别,试剂试液要求用色谱级别的,原因是为防止水和试剂试液中的杂质对色谱结果的干扰。

色谱柱会因不同的品种而有不同的要求,但每根色谱柱都有它的清洗要求,这个在色谱柱说明书上都可以找到,一定要根据上面的要求进行,否则会造成色谱柱效下降和色谱柱的使用寿命缩短。

检测波长也会因品种的不同有不同的要求,这里需要指出的是,要注意观察检测器氘灯能量的变化,比如基线波动大,活性成分的响应值突然变小等,都有可能是氘灯的能量不足所引起的。氘灯一般建议使用800小时,但实际上使用时间不止,可根据实际情况更换。

流速也因品种的不同而不同,一般为1.0ml/min,流速是不可随意改动的,特别是作为QC人员,但是作为研发人员,有时为了摸索条件或进行方法耐用性验证,会对流速进行改变以评价方法的适用性。

对于进样量因不同的品种也有不同规定,进样量这块现在都使用自动进样,所以进样精密度都很好,不需强调什么。

三、操作人员

首先作为液相操作人员,一定要认真学习说明书,掌握液相硬件和软件的操作,日常的维护保养和最基础故障的排除和维修。只要严格按照操作要求进行操作,一般不会出现问题。需要特别指出的是对于液相的日常维护保养很重要,比如流动相的过滤、脱气、泵密封垫的清洗、系统管路的清洗、溶剂过滤头的清洗等。倘若不坚持维护,很容易导致色谱柱堵塞、系统压力过大、色谱峰异常等不必要的故障,浪费时间。

其次操作人员在配制液相分析用样品溶液时,最好由同一个人单独完成,以免不必要的偶然误差。

四、液相安装环境

液相色谱仪应尽量安装于水平、远离振动、电磁干扰的屋内的台面上,有条件的话尽量将液相数据处理系统分隔开,一个是防止色谱基线噪音偏大,基线不稳等,一个是为减少对人体的危害。




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