高效液相色谱中常见的峰形畸变

在使用液相色谱仪时，经常会出现峰形畸变的情况。接下来就让我们一起来看看，如何才能避免峰形失真。 

当检测器因样品过载时会出现平顶峰响应。在这种情况下，检测器的灵敏度要高得多，并且会饱和以产生宽阔的平顶峰。一种选择是衰减信号响应（不是实际的解决方案），因为其他峰的检测也会受到影响。更可行的选择是降低样品浓度或进样量。 

峰拖尾是由于表面硅烷醇基团电离为 - Si-O - 提供阳离子交换位点而引起的常见失真。解决方案在于使用高纯度级硅胶载体以及推荐的 pH 值范围 2-8。 

缓冲液控制添加剂的使用也限制了硅胶表面上硅烷醇基团的电离。添加剂如三氟乙酸 (TFA) 是一种离子配对剂，有助于抑制电离。浓度范围为 10-25 mM 的缓冲液添加剂足以满足大多数应用的需求。 

通过过滤流动相溶剂、使用入口过滤器和更换泵密封件，在它们开始磨损和释放垃圾颗粒之前，可以防止筛板堵塞或空隙形成。 

低纯度二氧化硅通常含有促进硅烷醇基团电离的金属杂质。由于与固定相中的金属离子螯合，使用高纯度硅胶固定相有助于拖尾。 

与峰拖尾相比，峰前移不太常见 

通常由于色谱柱内的沟道而导致峰前移。最好更换色谱柱或以其他方式在推荐的 pH 范围内操作。 

色谱柱过载也会导致峰前移。使用稀释样品或减少进样量。 

流动相与样品的不相容性通常会导致峰前移。将样品溶解在流动相或其他兼容溶剂中 

肩峰和分裂峰通常是由于两种未分离的化合物的存在造成的。 

减少样品量或使用稀释溶液通常可以解决分裂问题 

峰的分裂也是由玻璃料堵塞引起的。使用 20 – 30 ml 流动相的反向流动通常可以解决峰分裂问题。 

更换堵塞的筛板或保护柱 

当由于存在两种接近洗脱的化合物而导致分裂时，请在进样前进行样品净化。