高效液相色谱仪有哪些优缺点和操作注意事项？

一、高效液相色谱仪的优缺点

优点：

分离效率高，选择性好，检测灵敏度高，操作自动化，应用范围广；

与气相色谱法相比具有的优点：不受试样的挥发性和热稳定性限制，应用范围广；流动相种类多，可通过流动相的优化达到高的分离效率；一般在啊室温下分析即可，不需高柱温。

缺点：

分析成本高，液相色谱仪价格及日常维护费用贵，分析时间一般比气相长。

二、高效液相色谱仪的操作注意事项

1、色谱柱的柱效和保护柱

拿到一根新柱时，一定要先看其使用说明，然后测柱效，定期检测柱效，保留在新色谱柱上得到的色谱图，并记录条件，定期检测仪器的谱带展宽，若应用于在线监测，应对色谱柱提供在线的物理保护和化学保护，例如采取安装在线过滤器，自装填料保护柱和预装保护柱等。在线过滤器的作用是防止颗粒在柱头累计，优点是基本不影响柱效，在需要高柱效的时候常用，常更换的消耗品是滤芯和垫圈。

保护柱的作用是防止柱子被化学污染，缺点是多数保护柱影响色谱柱的柱效，特别是在用微柱时，常用的是普通自装填料的保护柱。最近新出的一些保护柱例如Sentry-guard保护柱,它的特点是高质量、高效填料、增加分析柱效、对脏样品载荷能力大，能延长保护柱的寿命，手可拧紧接头，安装时不需要工具，省时省，可换芯式设计，能采用各种不同的填料，主要适用于非常脏非常复杂的样品本底，例如，生化样品，环境样品和食品等，或者不想做太多的固相萃取，不想降低柱效果等情况。

2、色谱柱的清洗

对所做的样品要有充分的了解，用对该样品洗脱能力最强的流动相清洗，对于硅胶柱，先用甲醇洗去极性杂质，然后用干燥的二氯甲烷和正庚烷100-200mL 依次活化，对于键和相柱，一般用甲醇-氯仿-甲醇-水依次冲洗， 每种色谱柱有特定的清洗方法， 一定要看其使用说明。

3、色谱柱的存放

存放前除去杂质和盐，采用合适的存放溶剂，避免色谱柱床的干枯，避免机械振动，防止细菌生长，注意存放的温度。

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