色谱柱的再生和维护规程
点击: 次 时间:2016-11-18 10:59
一、色谱柱的再生
色谱柱的再生因为色谱柱是消耗品，随着使用时间或进样次数的增加，会出现色谱峰高降低，峰宽加大或出现肩峰的现象，一般来说可能是柱效下降。
（1）反相柱的再生：
依次采用20～30倍的色谱柱体积的甲醇：水=10：90（V/V），乙腈，异丙醇作为流动相冲洗色谱柱，完成后再以相反顺序冲洗色谱柱。
（2）正相柱的再生：
依次以20～30倍色谱柱的体积的正己烷、异丙醇、二氯甲烷、甲醇作为流动相冲洗色谱柱，然后再以相反的顺序冲洗色谱柱。要注意上述溶剂必须严格脱水。
进行色谱柱再生时，应使用一个谦价的泵，我们建议最好不使用您的高效液相色谱仪上的泵。
注意：在对NH2改性的色谱柱进行再生时，由于NH2可能成铵根离子的形式存在，因此，应该在水洗后用0.1M的氨水冲洗，然后再用水冲洗至碱溶液完全流出。如果简单的有机溶剂/水的处理不能够完全洗去硅胶表面吸附的杂质，用0.05M稀硫酸冲洗非常有效。
二、色谱柱的维护
1.使用预柱保护分析柱（硅胶在极性流动相/离子性流动相中有一定的溶解度）；
2.大多数反相色谱柱的pH稳定范围是2～7.5，尽量不超过该色谱柱的pH范围；
3.避免流动相组成及极性的剧烈变化；
4.流动相使用前必须经脱气和过滤处理；
5.如果使用极性或离子性的缓冲溶液作流动相，应在实验完毕柱子冲洗干净，并保存大乙腈中；
6.压力升高是需要更换预柱的信号。
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色谱柱的再生因为色谱柱是消耗品，随着使用时间或进样次数的增加，会出现色谱峰高降低，峰宽加大或出现肩峰的现象，一般来说可能是柱效下降。
（1）反相柱的再生：
依次采用20～30倍的色谱柱体积的甲醇：水=10：90（V/V），乙腈，异丙醇作为流动相冲洗色谱柱，完成后再以相反顺序冲洗色谱柱。
（2）正相柱的再生：
依次以20～30倍色谱柱的体积的正己烷、异丙醇、二氯甲烷、甲醇作为流动相冲洗色谱柱，然后再以相反的顺序冲洗色谱柱。要注意上述溶剂必须严格脱水。
进行色谱柱再生时，应使用一个谦价的泵，我们建议最好不使用您的高效液相色谱仪上的泵。
注意：在对NH2改性的色谱柱进行再生时，由于NH2可能成铵根离子的形式存在，因此，应该在水洗后用0.1M的氨水冲洗，然后再用水冲洗至碱溶液完全流出。如果简单的有机溶剂/水的处理不能够完全洗去硅胶表面吸附的杂质，用0.05M稀硫酸冲洗非常有效。
二、色谱柱的维护
1.使用预柱保护分析柱（硅胶在极性流动相/离子性流动相中有一定的溶解度）；
2.大多数反相色谱柱的pH稳定范围是2～7.5，尽量不超过该色谱柱的pH范围；
3.避免流动相组成及极性的剧烈变化；
4.流动相使用前必须经脱气和过滤处理；
5.如果使用极性或离子性的缓冲溶液作流动相，应在实验完毕柱子冲洗干净，并保存大乙腈中；
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